### 人卵巢癌细胞A2780的培养指南

泛亚电竞 支持您在细胞培养领域的探索，为您提供详细的人卵巢癌细胞A2780的培养与冻存方法。以下是细胞培养的基本条件以及操作步骤。

#### 一、细胞培养条件

**细胞名称**: 人卵巢癌细胞A2780
**生长特性**: 贴壁生长
**冻存条件**: 无血清冻存液
**培养体系**: 1640培养基 + 10%胎牛血清（FBS） + 1% L-谷氨酰胺 + 1%青霉素/链霉素（P/S）
**传代方法**: 第一次建议1:2传代，每2天更换培养基。

**备注**: 请用无菌离心管收集培养基，以便进行对比培养。如对比效果不佳，建议选用泛亚电竞提供的完全培养基。

#### 二、细胞接收后的处理

为确保细胞处于良好状态，请将已培养的细胞灌满完全培养液并封口。接收细胞后，应使用75%酒精喷洒并消毒细胞瓶，在超净台内进行严格的无菌操作。随后，将细胞瓶放入37℃、5% CO2的培养箱中静置3-4小时，以稳定细胞状态。

使用显微镜观察细胞生长情况，并在不同倍率下拍照记录（建议40x, 100x, 200x各一张）。前三天的照片将成为重要的售后依据，若不提供照片则默认细胞状态良好。

#### 三、细胞培养步骤

a. 细胞传代：
当细胞未超过80%的汇合度时，将培养液收集至离心管，留5ml完全培养基，置于37℃、5% CO2的孵箱中培养。若细胞密度超过80%，请按以下步骤进行传代：

1. 弃去培养上清，用无钙镁PBS冲洗细胞1-2次。
2. 加入约1-2ml 0.25%胰蛋白酶，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，观察细胞。如细胞开始变圆并脱落，迅速进行下步操作。
3. 轻轻敲击培养瓶，加入5ml以上完全培养基终止消化。
4. 轻轻吹打使细胞完全脱落，转移至15ml离心管中，1000RPM离心5分钟。弃去上清，重悬于1-2ml完全培养基中。
5. 按1:2比例分瓶传代（两个T25瓶），补充新的完全培养基至5-8ml/瓶，然后放入37℃、5% CO2的细胞培养箱中。

b. 细胞冻存：
1. 细胞生长至培养瓶80%覆盖时，弃去培养液，用PBS清洗一次；
2. 加入约1ml 0.25%胰蛋白酶，观察细胞，待细胞回缩后加入5ml完全培养基终止消化，轻轻吹打使细胞脱落，转移至15ml离心管中，1000RPM离心5分钟；
3. 弃去上清，与1ml 泛亚电竞 无血清冻存液混匀，并转入冻存管中；
4. 将冻存细胞直接放入-80℃冰箱储存。若要转入液氮罐，需在-80℃冰箱存放超过24小时后再转入。

c. 细胞复苏：
1. 从液氮中取出冻存管，迅速放入37℃水浴中解冻，直至无结晶后用75%酒精擦拭外壁；
2. 将细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中，1000RPM离心5分钟；
3. 弃去上清，用5ml完全培养基重悬后接种至T25培养瓶，放于37℃、5% CO2的细胞培养箱中；
4. 第二天更换为新鲜的完全培养基继续培养。

#### 四、注意事项

某些细胞较为特殊，可能在运输过程中脱落，这是正常现象。请确保对培养瓶内所有培养液进行收集，然后进行适当的离心以处理细胞状态。如细胞运输出现问题，请按照上文指导进行操作。

#### 五、售后条款

如细胞出现问题，请及时与泛亚电竞联系，以下情况可重新发货：

• 运输过程中遭遇的各种问题，如细胞丢失、瓶身破损等。
• 细胞污染问题需在48小时内提出并提供真实实验结果。
• 常温发货细胞静置24小时后，干冰发货细胞复苏后24小时未存活。
• 如细胞活性问题需在7天内提供染色法测试结果。

#### 结语

感谢您选择泛亚电竞的人卵巢癌细胞A2780培养指南，愿您的研究工作顺利，如有任何疑问，请随时联系我们！