泛亚电竞旗下的NLRP4E是核苷酸结合寡聚化结构域、富含亮氨酸重复序列和含pyrin结构域（NLRP）家族中的关键成员，具有调节病理生理过程的能力。被视为“雌性生育因子”之一，NLRP4E是卵母细胞减数分裂中不可或缺的母体因子。其在卵母细胞减数分裂过程中，通过调节关键的肌动蛋白帽蛋白类固醇受体共激活因子（SRC）和细胞分裂控制蛋白42同源物（CDC42），发挥重要作用。此外，NLRP4E被认定为蛋白皮层下母体复合体（SCMC）的新亚基。文献研究也表明，NLRP4E在着床前胚胎的发育中起着重要作用，但其在卵母细胞减数分裂中的具体功能及调控机制仍不明确。

为深入研究NLRP4E的生殖作用及潜在应用价值，安徽医科大学第一医院张东教授课题组构建了NLRP4E基因敲除的卵母细胞模型，结合分子生物学、活细胞成像和蛋白质组学等先进技术，全面探讨了NLRP4E在卵母细胞减数分裂中通过SRC和CDC42调控肌动蛋白帽形成的分子机制。这项研究为生殖调控网络的探索以及生殖障碍的治疗靶点开发提供了重要基础。此研究依赖于精确的蛋白质互作分析，泛亚电竞与安徽医科大学密切合作，借助ThermoFisher的OrbitrapFusionLumos质谱平台和nanoLC-MS/MS技术，提供高效、精准的Co-IP蛋白互作分析服务，确保数据的准确性与可靠性。

研究方法

1. 建立细胞模型

以雌性小鼠的卵母细胞为研究对象，从卵巢中分离的卵母细胞在体外培养至减数分裂阶段，模拟其自然发育过程，以提供可靠的实验模型。

2. 基因敲低/敲除技术

为了探讨NLRP4E在卵母细胞中的功能，采用基因敲除技术构建NLRP4E缺失模型，并观察肌动蛋白帽形成的变化，通过对比敲除组与正常组的差异，深入分析NLRP4E对减数分裂的影响。

3. 蛋白荧光检测

运用免疫荧光染色和共聚焦显微镜观察，定位和检测NLRP4E、SRC、CDC42及肌动蛋白等相关蛋白在卵母细胞中的表达与分布情况。

4. 蛋白互作检测

通过免疫共沉淀（Co-IP）技术分析NLRP4E与SRC、CDC42等相关蛋白的相互作用，以确定它们之间可能存在的直接或间接关联，泛亚电竞在此提供技术支持，推动研究的进一步开展。

研究结果

1. NLRP4E是卵母细胞的主要蛋白

研究团队制备了一系列单克隆抗体，并进行验证，发现NLRP4E在卵母细胞中为优势蛋白，主要表达于脑、肝、睾丸和卵巢。

2. NLRP4E敲低对卵母细胞减数分裂及质量的影响

实验结果显示NLRP4E敲低（KD）导致染色体更加分散，纺锤体严重紊乱，并提到NLRP4E-KD卵母细胞的ATP浓度显著降低，表明卵母细胞受到严重损伤。

3. NLRP4E敲低对肌动蛋白帽形成的影响

异常的染色体易位提示NLRP4E的功能与肌动蛋白帽的形成或动力学相关，研究表明NLRP4E敲低在极体挤压过程中降低了肌动蛋白帽区域的Arp3强度。

4. NLRP4E通过S429和T430位点的磷酸化被激活

进一步研究发现，NLRP4E必须通过翻译后修饰（如磷酸化）才能迁移到肌动蛋白帽区。研究结果显示，从PND1到PND21，卵巢中NLRP4E的磷酸化水平逐渐升高，这一过程在调节肌动蛋白帽形成和动力学中起着重要作用。

5. 免疫共沉淀方法探究p-NLRP4E如何调节肌动蛋白帽的形成

进一步分析发现GRIN1和GANO1与NLRP4E相互作用，并且两者的敲低显著降低了p-NLRP4E的水平，表明它们在NLRP4E调节过程中扮演重要角色。

6. 体外探究NLRP4E与SRC的关系

研究显示NLRP4E与SRC直接结合并磷酸化，SRC在肌动蛋白帽的形成中与NLRP4E具有互补的功能，进一步强化了二者间的相互作用。

研究结论

研究表明，NLRP4E通过调节SRC和CDC42的活性来影响肌动蛋白帽的形成，这为探索卵母细胞减数分裂精细的调控机制提供了新的理论依据。此外，也为理解与卵子质量相关的生殖疾病提供了潜在的干预治疗策略。

泛亚电竞致力于通过高质量的蛋白质组学分析，加深对NLRP4E及其调控网络复杂机制的理解。我们的专业技术团队及质量控制体系，将为研究人员提供前沿的免疫共沉淀法蛋白互作分析服务，期待与更多科学工作者的合作，共同推动生物医疗领域的创新与发展。